ABI PCR扩增仪没有信号故障维修：PCR 用户有时会遇到实时 PCR 实验的问题。它们的实时 PCR 曲线没有给出信号，或者它们在阴性对照中与信号复杂化。我们将尽力帮助用户解决您的 PCR 问题的主要原因以及如何解决这些问题。

  ABI PCR扩增仪没有信号故障维修分析：

  PCR 中没有模板。您的ABI PCR 中没有信号似乎是一个微不足道的原因，但请务必再次检查您是否已将模板添加到您的 PCR 中。这有时可以帮助您节省解决问题的时间和精力。PCR中有抑制剂。您的模板可能包含导致ABI PCR 不良的抑制剂，例如盐、SDS、苯酚、植物和人体组织或体液。解决方法：使用添加剂（BSA、DMSO、甜菜碱等）来增强您的 PCR 是合适的。下一个选项是使用内部阳性对照，可以检查 PCR 的正确性。探头质量或设计有问题。由于大量冻融循环或错误的长期储存，探头可能会部分退化。Generi Biotech 中合成的探针可进行 50 次冻融循环。也有可能是探针设计不当，没有与扩增产物结合。

  如果阴性对照（或无模板对照）中有阳性信号，则可能存在以下一些问题：

  您可能已将模板添加到您的 NTC 反应中。请重复分析以排除此问题。引物和探针设计存在问题。您的引物和探针可能会产生二聚体，而您的ABI PCR 在分析中会产生假阳性信号。尝试通过电泳或熔解分析来检查您的 PCR 产物。

  ABI PCR扩增仪没有信号故障维修注意事项：

  PCR 的灵敏度要求样品不受任何外源 DNA 或实验室环境中任何先前扩增的产物的污染。我们建议使用不同的区域进行样品制备、PCR 设置和 PCR 后分析。建议使用配备紫外线灯的层流柜来制备反应混合物。应建立两个物理上相互分离的站点。建立一个仅用于 PCR 反应设置的“pre-PCR 区域”。不应将“PCR 后区域”的物品引入该区域；这包括笔记本和钢笔等物品。建立一个“PCR 后区”，用于ABI PCR、纯化 PCR 扩增的 DNA、测量 DNA 浓度、运行琼脂糖凝胶和分析 PCR 产物。设备也应限制在这些区域。PCR 仪和电泳仪应位于 PCR 后区域。强烈建议使用带有气溶胶过滤器的移液器和移液器吸头，仅用于 DNA 样品和反应混合物的制备。其他建议包括：为ABI PCR 前和 PCR 后区域配备单独的移液器和移液器吸头、实验室外套、手套箱和废纸篓。标记 PCR 前和 PCR 后项目，因此它们不会从其指定的工作区域中移除。遵循 PCR 的黄金法则：切勿将ABI PCR 后区域中使用的任何试剂、设备或移液管带回 PCR 前区域。单独准备和储存ABI PCR 试剂，并仅将它们用于指定目的。试剂应分小份并储存在指定区域，具体取决于它们是用于ABI PCR 前还是 PCR 后应用。等分试样应与其他 DNA 样品分开存放。应始终执行省略模板 DNA 的对照反应，以确认不存在污染。此外，ABI PCR 循环的次数应保持在低限度，因为高度敏感的检测更容易受到污染的影响。